本發明公開了一種人類和其他哺乳動物細胞附著體表達載體、表達系統、制備方法和應用,屬于基因工程與基因治療技術領域。該附著體表達載體上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β?干擾素MAR序列(或者與該序列95%以上同源的核苷酸序列),相較包含全長MAR序列或387bp MAR序列的表達載體,該載體能高效、持續、穩定地表達外源目的基因,尤其是包含E段MAR序列的載體表達最佳,可用于基因治療。在該載體中,分段MAR序列插入載體的多克隆位點也即eGFP下游處,一方面能克服轉基因沉默,另一方面能提高目的蛋白的表達水平以及后續單克隆細胞株篩選的有效性。