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本發明屬于細胞生物學領域，具體涉及一種人臍帶血間充質干細胞的培養方法。包括以下步驟：將臍帶血單個核細胞用第一培養基培養至細胞生長狀態穩定，后續改用第二培養基進行培養，所述第一培養基主要由基礎培養基、胎牛血清、抗生素和間充質干細胞生長添加物組成，其中胎牛血清體積占比為8?12％，間充質干細胞生長添加物體積占比為0.1?0.2％；所述第二培養基主要由基礎培養基、胎牛血清、抗生素組成，其中胎牛血清體積占比為8?12％；所述基礎培養基為DMEM/F12培養基。本發明的人臍帶血間充質干細胞的培養方法，步驟簡單、經濟成本較低、培養成功率高，適于獲取大量的間充質干細胞以滿足相關疾病治療時的使用量較大的需求。

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