本發明涉及一種細胞系中食管癌功能基因敲除后增殖表型的快速鑒定方法,屬于分子生物學技術領域。本發明中的細胞系中食管癌功能基因敲除后增殖表型的快速鑒定方法,利用流式細胞分選儀,將200個帶有載體熒光標簽的陽性細胞群分選到96孔板的兩個孔中,培養0h后進行片段分析(Fragment analysis,FA),可檢測到CRISPR?Cas9打靶該功能基因后目的基因座發生有效編輯的克隆;培養7天后,再次進行片段分析,此時片段分析峰圖可根據不同細胞的增殖特性發生變化,其中增殖速度快的細胞出峰顯著,而增殖速度慢的細胞群則出峰不明顯,甚至不出峰;由此可快速判斷食管癌功能基因敲除后的增殖表型。
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