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本發明公開了一種基于銅離子催化環化生成黃酮類中間體的反應型熒光探針及其制備方法和應用，屬于銅離子熒光探針技術領域。本發明的技術方案要點為：一種基于銅離子催化環化生成黃酮類中間體的反應型熒光探針，其結構式為：。本發明還具體公開了該熒光探針的制備方法及其在Hela活細胞中進行銅離子檢測的應用。在金屬選擇性實驗中，該熒光探針的熒光增強只能由銅離子（超過200倍）誘導，而不能由其它金屬和生物硫醇誘導。因此，該熒光探針對銅離子表現出良好的選擇性。基于此建立了一種快速、簡便的檢測銅離子的熒光檢測方法。

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