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本發明公開了一種基于香豆素席夫堿銅離子配合物硫醇熒光探針及其制備方法和應用，其中以香豆酰肼和2,6?吡啶二甲醛為原料合成了一種香豆素類席夫堿衍生物(化合物1)，化合物1在與銅離子配位后形成了席夫堿結構的香豆素類?銅離子配合物,即為(化合物1?Cu2+)。該探針由于Cu2+的順磁性及螯合作用的影響，使化合物1熒光淬滅。當加入巰基氨基酸后，化合物1?Cu2+熒光增強。而其它非巰基氨基酸幾乎不影響。紫外可見光譜吸收和熒光光譜表明化合物1?Cu2+在CH3CN:HEPES(3:2,v/v)溶液中對含有巰基的氨基酸具有良好的選擇性和靈敏性。本發明成功用于人子宮頸鱗癌細胞中，進行了檢測谷胱甘肽的細胞成像實驗。有望用于生物體內硫醇化合物的檢測。

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